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分享三種關(guān)于嘔吐毒素免疫親和柱對(duì)樣品處理的方法

發(fā)布時(shí)間: 2021-06-17  點(diǎn)擊次數(shù): 3691次
  嘔吐毒素免疫親和柱主要是由鐮刀菌的某些種產(chǎn)生的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性相似的有毒代謝產(chǎn)物——單端孢霉烯族化合物中的一種。廣泛存在于全球,主要污染小麥、大麥、玉米等谷類(lèi)作物,也污染糧食制品,人和動(dòng)物在誤食被該毒素污染的糧谷類(lèi)后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應(yīng)。DON明顯的毒性作用是引起嘔吐、腹瀉、腹痛等癥狀,并延緩生長(zhǎng)、降低免疫機(jī)能,與貧血、免疫抑制、食管癌、克山病也具有密切聯(lián)系。給人、家畜的健康造成巨大威脅。
 
  試驗(yàn)原理:
  本產(chǎn)品的測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),脫氧雪腐鐮刀菌烯醇單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠上,樣品中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾、稀釋?zhuān)缓髮悠诽崛∫壕徛耐ㄟ^(guò)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇免疫親和層析柱,在免疫親和柱內(nèi),脫氧雪腐鐮刀菌烯醇與抗體結(jié)合,之后洗滌免疫親和柱除去沒(méi)有被結(jié)合的其他物質(zhì)。用甲醇洗脫脫氧雪腐鐮刀菌烯醇,然后注入到分析儀器中用于檢測(cè)。

  嘔吐毒素免疫親和柱的樣品處理:
  方法一:酒類(lèi)
  取脫氣的酒類(lèi)樣品加入聚乙二醇8000,用PBS緩沖液定容;高速均質(zhì);用快速定性濾紙過(guò)濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過(guò)濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過(guò)免疫親和柱凈化。
  稀釋倍數(shù):2
 
  方法二:醬油、醋、醬及醬制品;
  取樣品,加入聚乙二醇8000,用PBS緩沖液定容;高速均質(zhì);用快速定性濾紙過(guò)濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過(guò)濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過(guò)免疫親和柱凈化。
  稀釋倍數(shù):2
 
  方法三:糧食及飼料
  1、玉米、小麥、面粉、配合飼料、濃縮料、精補(bǔ)料等吸水性較小的樣本;
  稱(chēng)取粉碎樣品,聚乙二醇8000,加入蒸餾水;高速均質(zhì);用快速定性濾紙過(guò)濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過(guò)濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過(guò)免疫親和柱凈化。
  稀釋倍數(shù):2
  2、麩皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性較強(qiáng)的樣本;
  稱(chēng)取樣品,聚乙二醇8000,加入蒸餾水;高速均質(zhì);用快速定性濾紙過(guò)濾,收集濾液;再用微纖維濾紙過(guò)濾,并收集濾液作為上樣液;取上樣液過(guò)免疫親和柱凈化。
  稀釋倍數(shù):2
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