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短裸甲藻貝類(lèi)毒素抗體

短裸甲藻貝類(lèi)毒素抗體

簡(jiǎn)要描述:短裸甲藻貝類(lèi)毒素抗體產(chǎn)品可用于ELISA,免疫層析等檢測(cè)產(chǎn)品的研制,用于神經(jīng)性貝類(lèi)毒素檢測(cè),靈敏度高,效價(jià)高。

產(chǎn)品型號(hào): IAC-02446877

所屬分類(lèi):神經(jīng)性貝類(lèi)毒素

更新時(shí)間:2024-12-09

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

詳情介紹

短裸甲藻貝類(lèi)毒素抗體產(chǎn)品可用于ELISA,免疫層析等檢測(cè)產(chǎn)品的研制,用于神經(jīng)性貝類(lèi)毒素檢測(cè),靈敏度高,效價(jià)高。

免疫分析法是基于抗體與抗原或半抗原之間的高選擇性反應(yīng)而建立起來(lái)的一種生物化學(xué)分析法,即根據(jù)抗原-抗體反應(yīng),采用特異性抗體來(lái)檢測(cè)藥物、激素、蛋白質(zhì)、微生物等物質(zhì)的定量分析方法。免疫分析法主要包括酶聯(lián)免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)、放射性免疫法、熒光免疫法等,具有方便、快速的特點(diǎn),但也存在一定的缺點(diǎn),如費(fèi)用較高、毒素之間的交叉反應(yīng)難避免、實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性較差等。

ELISA是檢測(cè)海洋生物毒素所采用的主要免疫方法。該技術(shù)可用目測(cè),也可用酶標(biāo)儀測(cè)定光密度值,具有易定性定量的優(yōu)點(diǎn)[6]。Tsao等[7]采用單克隆抗體ELISA檢測(cè)法檢測(cè)ASP中的軟骨藻酸(domoic acid, DA),并建立了基于單克隆抗體的膠體金免疫條檢測(cè)法;該方法的檢測(cè)限為5 ng/mL,在10 min內(nèi)就可完成測(cè)定,提示免疫條檢測(cè)可用來(lái)快速檢測(cè)貝類(lèi)樣品中的DA。也有研究者建立了基于基因工程單鏈抗體競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)方法,該方法最大的優(yōu)勢(shì)是毒素可在大腸桿菌中快速、大量得到表達(dá),且容易和其他小分子融合,形成融合蛋白以用于檢測(cè)或其他用途;對(duì)該方法進(jìn)行驗(yàn)證發(fā)現(xiàn),其與標(biāo)準(zhǔn)高效液相色譜法(high-performance liquid chromatography, HPLC)檢測(cè)結(jié)果有較好的相關(guān)性[8]。李軍濤等[9]建立DSP免疫熒光層析試紙條檢測(cè)方法,靈敏度可達(dá)0.125 μg/mL,達(dá)到我國(guó)貝類(lèi)產(chǎn)品中DSP所允許的*。Dubois等[10]建立了間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)STX,該方法用毒素的偶聯(lián)物免疫產(chǎn)生的抗體來(lái)檢測(cè)貽貝、牡蠣和扇貝中的STX類(lèi)毒素;在檢測(cè)之前,用90%的乙醇溶液將STX類(lèi)毒素從貝類(lèi)組織里快速提取出來(lái),該方法的*檢測(cè)限為5 μg/kg。Garthwaite等[11]也建立了4類(lèi)貝毒的ELISA方法,均可滿(mǎn)足貝類(lèi)提取物中樣品的鑒定,且樣品回收率較高。TTX為氨基全氫喹唑啉型化合物,是自然界中所發(fā)現(xiàn)的毒性最大的神經(jīng)毒素之一[12]。Thattiyaphong等[13]建立了一種側(cè)流免疫層析技術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)TTX的快速檢測(cè),并運(yùn)用該方法檢測(cè)了河鲀及食用魚(yú)中TTX的含量;與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)相比,該方法的靈敏度為94.0%,特異性為92.4%。總的來(lái)說(shuō),側(cè)流免疫層析技術(shù)可用于大批量樣本的篩選,陽(yáng)性結(jié)果的樣本再使用LC-MS/MS進(jìn)行確認(rèn),減少了LC-MS/MS的測(cè)試量,降低了檢測(cè)成本。Reverte等[14]開(kāi)發(fā)了一種基于雙硫醇自組裝單分子膜的新ELISA方法,該方法可用于檢測(cè)河鲀中TTX的含量,檢測(cè)限為0.23 mg/kg,其與LC-MS/MS法的相關(guān)性為0.991。

大田軟海綿酸(okadaic acid, OA)是DSP中的主要成分,屬于聚醚類(lèi)海洋生物毒素,尚無(wú)致死病例,但長(zhǎng)期攝入可以致畸及致癌[15]。劉仁沿等[16]通過(guò)細(xì)胞融合,制備抗OA單克隆抗體和膠體金標(biāo)記抗體,建立快速檢測(cè)OA的免疫層析試紙條分析方法,該方法檢出限為500 ng/mL。該研究組在此基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn),使用卵清蛋白合成高耦聯(lián)比的包被抗原,以硝酸纖維素膜為載體,改進(jìn)后方法檢測(cè)限達(dá)12 ng/mL[17]。張洋等[18]采用自行研發(fā)的免疫膠體金試紙條對(duì)雙貝殼類(lèi)DSP的主要成分OA的污染情況進(jìn)行調(diào)查,通過(guò)與ELISA檢測(cè)法的結(jié)果進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)該方法檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠,未出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。Johnson等[19]對(duì)4種已經(jīng)商業(yè)化的快速檢測(cè)試劑盒是否可檢測(cè)英國(guó)雙殼貝類(lèi)中的DSP進(jìn)行驗(yàn)證。這4種試劑盒包括1種ELISA試劑盒、1種蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)試劑盒以及2種側(cè)流免疫測(cè)定(lateral flow immunoassay, LFI)試劑盒。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,ELISA與LC-MS/MS具有較好的相關(guān)性,且不存在結(jié)果偏大的情況,但是存在假陰性結(jié)果;



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